細胞培養支原體污染是一種常見的問題,它會導致細胞生長和增殖受到抑制,從而影響實驗結果。以下是可能出現的問題:
細胞生長緩慢或停滯不前:支原體會占據細胞內的營養源并抑制其他微生物的生長,從而導致細胞缺乏足夠的營養供應,生長速度變慢或停滯不前。
細胞形態異常:支原體感染會導致細胞形態發生改變,如細胞變得不規則、腫脹、變形等。
細胞凋亡增加:支原體感染會釋放一些有害物質,這些物質會干擾細胞的正常功能,導致細胞凋亡增加。
細胞代謝異常:支原體感染會影響細胞的代謝過程,導致代謝產物積累和能量消耗增加,從而影響實驗結果。
細胞產生異常蛋白質:支原體感染會導致細胞內蛋白質合成受到影響,從而產生異常蛋白質,這可能會影響到實驗結果。
細胞產生抗生素耐藥性:支原體感染會使細胞產生抗生素耐藥性,這意味著在后續實驗中需要使用更高劑量的抗生素才能達到相同的效果。
實驗結果不可信:由于支原體污染會影響實驗結果的準確性和可靠性,因此如果實驗結果受到了支原體污染的影響,那么這些結果就不具備科學價值。
傳染風險:如果細胞培養液被支原體污染,那么這些污染物可能會傳播到其他實驗室設備或人員身上,從而增加傳染風險。
支原體是一種常見的細胞內寄生菌,它會對細胞的生長和增殖產生負面影響。如果您的細胞培養支原體污染了,可以采用以下方法清除支原體:
對于非重要的細胞,如培養中的細胞、WCB的細胞等,將培養物與用過的培養基滅活后丟棄即可。
對于較為重要的細胞,如來源珍貴或實驗室中細胞保藏量較小等可以采用以下(2)-(8)的方法:
用清洗純化法清除支原體污染的方法:細胞營養馴化→優質細胞群的篩選→細胞清洗→反復離心洗滌,其原理是利用離心力、細胞、微生物質量和懸液的浮力差達到清除支原體的目的。
用抗生素清除支原體污染的方法:根據抗生素敏感譜選擇合適的抗生素,加入含有抗生素的培養基中,使抗生素濃度達到抑制或殺死支原體的水平。
用抗代謝產物清除支原體污染的方法:加入含有抗代謝產物的培養基中,使抗代謝產物濃度達到抑制或殺死支原體的水平。
用基因工程技術清除支原體污染的方法:通過基因工程技術構建具有抗支原體活性的工程菌株,并將其導入到宿主細胞中。
用物理方法清除支原體污染的方法:如超濾、反滲透、離子交換等。