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培養皿中如何生產眼淚?干細胞培養基助力科研

更新時間:2024-01-20  |  點擊率:360

干細胞的維持、增殖和分化通常需要在適當的培養條件下進行。Ausbian干細胞專用培養基,是在含微量胎牛血清的基礎培養基中,通過添加一種人永生化干細胞系的條件培養基混合組成,是一款即用型干細胞培養基,適合各類干細胞生長繁殖。

 

覆蓋眼睛的結膜上皮包含兩種主要的細胞類型:產生黏液的杯狀細胞和分泌水的角化細胞,它們的頂端表面呈現黏液。近日,科研人員描述了長期擴張的類器官和代表小鼠和人結膜的氣液界面。原代和培養人結膜的單細胞RNA表達圖譜顯示,角質形成細胞表達多種抗菌肽,并識別結膜簇細胞。IL-4/-13暴露增加杯狀細胞和簇狀細胞分化,并顯著改變結膜分泌組。人NGFR+基底細胞被鑒定為雙能結膜干細胞。結膜培養物可被單純皰疹病毒1(HSV1)、人類腺病毒8(hAdV8)SARS-CoV-2感染。添加藥物可以逆轉HSV1感染,而缺乏批準藥物治療的hAdV8感染可以被相關藥物抑制??蒲腥藛T記錄了HSV1hAdV8誘導的轉錄程序。

 

相關研究成果發表在《Cell Stem Cell》上,文章標題為:“Human Conjunctiva Organoids to Study Ocular Surface Homeostasis and Disease"。

 

結膜位于眼瞼的內表面,覆蓋著鞏膜(眼睛的白色部分)。它由含有成纖維細胞、血管和免疫細胞的間質層組成,被非角化層狀上皮覆蓋兩種分化的上皮細胞類型已被識別:產生黏液的杯狀細胞和分泌黏液的角化細胞在其頂端表面暴露黏液大多數關于結膜的研究都集中在杯狀細胞上,因為杯狀細胞與淚腺一起產生覆蓋在眼表面的淚膜的粘蛋白層黏液層對淚液膜的平衡至關重要:它使淚液的水層附著在眼表面,防止蒸發性干眼癥然而,結膜角質形成細胞除了創造富含黏液的上皮屏障之外的作用以及結膜干細胞的身份都沒有被揭示

 

對眼表的研究主要集中在一個對視力至關重要的組織——角膜上然而,結膜對視力同樣至關重要:它的功能障礙最終會影響角膜的內穩態,并可能導致失明。結膜為眼表提供免疫保護其次,如果物理或病毒損傷了結膜,淚膜就會不穩定,導致干眼病、不適,最終失明了解結膜內平衡和疾病的一個主要障礙是缺乏具有代表性的體外模型。事實上,多年來建立的結膜上皮模型存在一些局限性:它們要么是在不明確的條件下培養的短期外植體(即,在飼養細胞或羊膜上),要么來自誘導多能干細胞,這些干細胞通常不能再現結膜上皮的細胞多樣性和成熟度。然而,目前還沒有一種方案可以讓初級結膜組織在規定的條件下長期生長。

 

能長期傳代繁殖的成體干細胞類器官先從腸道組織中建立類器官是三維結構,概括了原始組織的基本結構和功能。類器官可以在受控環境中模擬人類生理和疾病的各個方面在這里,科研人員建立了小鼠和人類從初級結膜衍生的類器官,表明它們概括了結膜上皮的關鍵特征,并為研究結膜(病理)生理學提供了一個通用的平臺。