動物血清是生命科學、生物醫(yī)學研究中,中常用的一種試劑,它含有豐富的蛋白質(zhì)、激素和其他生物分子,對細胞生物學相關研究有重要意義。
然而,有時我們可能會在血清中觀察到白色絮狀沉淀的存在,這引起了科研人員的關注。本文將揭秘血清中白色絮狀沉淀的原因,并提供一些解決方法。
1、蛋白質(zhì)沉淀:血清中的蛋白質(zhì)在特定條件下可以發(fā)生聚集和沉淀,形成白色絮狀物質(zhì)。這可能是因為pH的變化、溫度的升高、離子強度的變化等因素導致的。
2、脂質(zhì)沉淀:某些血清樣本中含有高濃度的脂質(zhì),當血清遭受震動或劇烈攪拌時,脂質(zhì)會凝聚并形成白色絮狀沉淀。
3、微生物污染:血清營養(yǎng)豐富,如果在使用過程中操作不規(guī)范,很有可能被微生物污染,產(chǎn)生白色沉淀。一般表現(xiàn)為:血清解凍后無明顯沉淀,但使用一段時間后,出現(xiàn)了大量沉淀。
一般來說,正常的蛋白質(zhì)沉淀和脂質(zhì)沉淀,不會影響血清的功能。而微生物污染引起的血清沉淀,危害比較大,建議直接丟棄,并對實驗環(huán)境進行清潔,更換新的血清。
血清如需長期儲存,建議保存在-20℃的環(huán)境中,溫度經(jīng)常改變,導致血清反復凍融,會更容易造成沉淀的產(chǎn)生,因此在運輸途中,應全程冷鏈運輸,減少因反復凍融而出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象。
解凍血清時,建議采用三步法,解凍時,規(guī)則搖晃均勻,使溫度及成分均一,達到充分混合血清的目的,確保其中的成分均勻分散。
在日常在使用血清時,解凍好的血清不宜將血清置于37℃太久,否則高溫容易使血清變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
常規(guī)情況下,胎牛血清無需熱滅活。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則不建議進行熱滅活。
非生物污染因素產(chǎn)生的血清沉淀,不會影響血清本身的功能,但從使用體驗角度出發(fā),大量的沉淀很容易遮擋視線,影響對培養(yǎng)基狀態(tài)的觀察;而微量沉淀又容易與細胞污染混淆,影響實驗人員的判斷。
因此,如果血清中有非生物污染的沉淀,想要去除,該如何操作呢?
我們推薦采用低速離心的方法:1000rpm以內(nèi),1-2分鐘,或簡單讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里。
一般不推薦過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾。
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