分子相關實驗,需要保證實驗室的潔凈。定期清潔實驗室,有利于提高實驗結果的穩定性。
過氧化物酶Pex5、Pex13和Pex14在過氧化物酶體靶向信號1 (PTS1)通路的蛋白易位步驟中起關鍵作用。Pex5通過識別PTS1基序(羧基端三肽序列絲氨酸-賴氨酸-亮氨酸(SKL)或其變體)與細胞質中的貨物蛋白結合。貨物結合時的構象改變暴露了一個內在無序區(IDR),該區域與過氧化物酶體膜蛋白Pex13和Pex14相互作用,導致貨物蛋白易位到過氧化物酶體基質。
在過氧化物酶體中沒有觀察到通道結構,也沒有驗證過運輸的物理模型,但提供了一些證據,證明至少是瞬時形成的通道。在一項體外研究中,用Pex14復合物重建的脂質膜在直徑達9納米的貨物中顯示出pex5 -貨物依賴的離子電導。
Pex5、Pex13和Pex14中idr的序列特征類似于核孔復合物(npc)的核孔蛋白,這為可能的轉運機制提供了線索。值得注意的是,Pex13在其IDR中具有一系列Tyr-Gly (YG)重復序列。
研究人員推斷這些殘基可能通過π -π或π -陽離子相互作用發生LLPS,類似于核孔蛋白中ph - gly (FG)重復序列形成的LLPS,并構成NPC的選擇性滲透性過濾器;我們假設產生的凝聚形成了一個簡單的、原始的、瞬態的類似npc的集合。
相關研究發表在《Nature》上,文章標題為“Peroxisome biogenesis initiated by protein phase separation"。
締一生物的德國Minerva Biolabs公司的DNA污染清除試劑:PCR-Clean,高效清除核酸以及核酸酶污染,高效便捷。
這一假設為蛋白質進入過氧化物酶體提供了一種自然的解釋,過氧化物酶通過LLPS形成生物分子凝聚物,并為貨物通過過氧化物酶體膜運輸創造了一個短暫的管道,Pex5類似于核細胞蛋白充當穿梭受體。出芽酵母酵母S. cerevisiae Pex13在其IDR中具有芳香重復序列,Pex5和Pex13在其IDR中具有明顯的朊病毒樣結構域(PLDs),這些結構域已被證明通過多價π -π或π -陽離子“貼紙"相互作用形成生物分子凝聚物。
事實上,在ATP耗竭的情況下,過氧化物酶體蛋白以大型復合物的形式沉淀,這表明它們的形成先于易位。因此,研究人員開始驗證過氧化物酶體蛋白轉運通過Pex5-cargo-Pex13-Pex14 LLPS發生的假設。
締一生物的德國Minerva Biolabs公司的DNA污染清除試劑:PCR-Clean有噴霧和濕巾兩種清潔方式,打開包裝即可使用,安全便捷高效。