培養(yǎng)原代細胞是一項復雜的工作,其關鍵點包括以下幾個方面:
細胞類型選擇:不同類型的細胞需要不同的培養(yǎng)條件,因此首先需要明確要培養(yǎng)的細胞類型,例如動物細胞、植物細胞等。
培養(yǎng)基的配制:培養(yǎng)基是細胞生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的混合物,需要按照特定的配方制備。不同類型的細胞需要不同的培養(yǎng)基,因此需要根據(jù)細胞類型選擇適合的培養(yǎng)基,并嚴格按照配方制備。另外,血清也是一個重要因素。Ausbian進口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,品質(zhì)穩(wěn)定。
細胞培養(yǎng)條件的控制:細胞需要特定的生理和環(huán)境條件才能生長和分裂。因此需要控制培養(yǎng)箱中的溫度、濕度、CO2濃度、通氣性等參數(shù),以及培養(yǎng)皿的密閉性和材料的選擇等因素,以提供適合的生長環(huán)境。
細胞的傳代:細胞在培養(yǎng)基中生長和分裂,逐漸形成細胞層。為了保持細胞的生長狀態(tài)和活性,需要及時將細胞移植到新的培養(yǎng)皿中進行傳代,以維持細胞的生長和分裂。
消除細胞污染:在細胞培養(yǎng)過程中,細胞污染是常見的問題,如細菌、真菌、病毒等。因此需要采取適當?shù)拇胧鐪缇⑾尽⑦^濾等,以避免細胞污染對細胞生長和實驗結果的影響。
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。