細胞污染是指在細胞培養(yǎng)的過程中,外來的生物或物質(zhì)進入培養(yǎng)體系中并繁殖生長,影響細胞的正常生長和實驗結(jié)果,主要包括以下幾點:
細胞生長和增殖受到抑制。細胞污染會占用培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣,導致細胞的生長和增殖受到抑制,甚至會導致細胞死亡。
實驗結(jié)果的穩(wěn)定性受到影響。細胞污染會導致實驗中出現(xiàn)異常的數(shù)據(jù)和結(jié)果,影響實驗的可靠性和準確性。在一些研究中,細胞污染甚至會導致實驗失敗,浪費時間和資源。
細胞的基因表達和細胞功能受到影響。細胞污染可能會導致細胞基因表達水平的改變和細胞功能的異常。這些異常可能會被錯誤地歸因于實驗因素而掩蓋真正的實驗結(jié)果。
細胞污染對細胞培養(yǎng)的影響非常嚴重,因此,進行細胞培養(yǎng)實驗時,需要提高警惕,盡可能降低細胞污染的可能性。
預防污染的關鍵點
Cell Culture
這里,我們總結(jié)了一些常見的污染“雷區(qū)",幫助大家盡可能“掃除"細胞培養(yǎng)過程中障礙。如有遺漏,歡迎小伙伴們在評論區(qū)中補充。
雷區(qū)一:解凍過程操作不當
水面超過冷凍管蓋沿×
正常情況下,細胞凍存管內(nèi)部為無菌設計,保障細胞安全。解凍時,凍存管的蓋子下邊緣應位于水浴鍋頁面上方,避免其接觸水面。
另外,需要定期清潔水浴鍋,為水浴鍋更換無菌水。可以使用德國MB水浴環(huán)境專用的支原體祛除試劑:Water Shield。
雷區(qū)二:培養(yǎng)基配制過程操作不當
忽視無菌操作,導致培養(yǎng)基被污染×
在整個細胞培養(yǎng)過程中,都應注意無菌操作。在細胞培養(yǎng)基配好后,建議先抽取少許放入培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿內(nèi),在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置24~48h,檢測培養(yǎng)液是否有污染。
胎牛血清的品質(zhì)對于細胞培養(yǎng)而言也是十分重要的。選擇一款內(nèi)毒素含量低、通過各項無菌檢測的胎牛血清,既保證了實驗安全,又可以在一定程度上確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定。
Ausbian進口特級胎牛血清,內(nèi)毒素含量≤3EU/ml,各項微生物均為未檢出。
雷區(qū)三:沒有定期維護實驗室衛(wèi)生
實驗垃圾不及時清理,實驗環(huán)境不及時清潔×
要根據(jù)使用頻率定期清潔實驗室,包括超凈臺操作臺面;細胞實驗室臺面;培養(yǎng)箱、冰箱、水浴鍋、離心機、顯微鏡等實驗設備及儀器等。
德國MB的Mycoplasma-off,支原體祛除噴霧劑,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體、真菌、細菌等微生物,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。