胎牛血清用于細胞培養不過百年歷史,但發展得相當快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細胞培養技術的方面,國外起步較早,認識也較深入。應該說,胎牛血清在細胞培養基方面,具有較好的優勢。因為其營養全面,所以幾乎適合所有類型的細胞生長,每種細胞都可以從中攝取自己所需的養分。而且,胎牛血清還含有適合細胞貼壁鋪展以及抗氧化和解毒的成分,這使得它成為天然通用的優質培養基。
牛血清分為胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出生一天~一周內的新生牛;
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
胎牛血清含有豐富的胚胎發育過程中必須的一些生長因子和激素等。胎牛血清在細胞培養方面通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。
據研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續使用胎牛血清時,要注意盡量選同一批次的。通常,同一批次的血清數量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細胞的生長和狀態。
目前,國內市面上的胎牛血清有進口,有國產。進口品牌有的較為,如Gibco,但價格很高,同時假冒也多。許多高仿的Gibco血清,和真品相比,瓶子及標簽包裝極為相似,若不仔細觀察,很難分辨出來。但實際上質量差別較大,假冒血清價格也較低。同時,在外包裝上仍然會找到區別(如條形碼、角標),但前提是手邊要有一瓶真品的血清。
許多實驗室經費有限,這時可選擇性價比更高的血清。即與較好品牌血清的質量差不多,但價格要低一些的血清,如Ausbian血清等。該品牌較為低調,但口碑不錯,為細胞典藏等重大項目推薦血清。有些品牌血清,則只適用于培養一些容易生長的細胞,對于一些較為難養的細胞,則常常效果不佳。尤其是干細胞、前體細胞,對培養環境較為敏感,因此,要注意進行辨別。同時,應注意查看血清的質控證書,尤其是病毒檢測部分,它對保證血清質量非常重要。
血清的數據積累也可反映血清的質量。好血清培養出來的細胞形態舒展,增殖旺盛,鏡下無雜質,細胞倍增時間和克隆率較為理想。同時,要注意血清對細胞培養的長期效果,因為有些影響短時間并不顯現。血清內毒素也是值得注意的一個方面,因內毒素會對細胞帶來不良影響,因此應選用內毒素低的血清,效果方好。文獻引用和報道也是血清使用數據的一部分,反映血清的使用效果,
后還要注意品牌血清的供應情況,有些血清供應不穩定,這樣就會對后期實驗產生影響。
后祝大家實驗順利!