透析胎牛血清也是用于細胞培養,但同時,又有自己的一些特殊應用。本文締一生物為您分析透析胎牛血清的三大用途。
一、摻入研究
例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性:即為什么它只感染呼吸道上皮細胞,而不感染其他細胞。
他們將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質粒內,并轉染293T細胞。轉染后第20小時,細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養了45分鐘(讓細胞處于饑餓狀態,因培養基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養基中培養,但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。
培養4小時后進行分析。即裂解細胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯影,分析F蛋白的表達情況。發現F蛋白的表達確實增加了,但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。
值得指出的是,用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標記細胞內的蛋白,結合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發生的某一蛋白的變化,從而發現該蛋白所扮演的角色,的確是一個普遍有效的方法(在研究信號分子磷酸化的方面,則需要使用32P標記的磷酸鹽)。
在這其中,透析胎牛血清的使用*,即給細胞創造一個無外源氨基酸干擾的環境。
二、細胞水平的藥物篩選
例如:有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷。他采用報告基因進行監測。為了避免細胞培養環境中存在的小分子的干擾,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養基來培養細胞。
類似在藥物研發過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無外源小分子的培養體系,因而也要用透析胎牛血清。
三、細胞克隆的篩選
包括雜交瘤細胞和CHO細胞等,由于在進行細胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。
產品說明
采用Ausbian進口特級胎牛血清,透析過濾去除10000D以下小分子(如次黃嘌呤和胸腺核苷),避免外源小分子對細胞產生干擾。適合脈沖示蹤實驗(例如同位素標記特定小分子,并加入到培養體系中,以研究細胞代謝),也適合轉染CHO后的篩選等應用。
描述
1. 精選內毒素更低批次,細胞更健康。
2.每個批次提供完整的檢測報告。
3.全程冷鏈運輸,不出現凍融現象,保證質量不受影響。
4.100毫升,500毫升多種包裝選擇,適合不同實驗用量需求。
5.國內現貨儲備,避免貨運風險。