貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 存儲(chǔ) |
M2092 | HiCrome™ Shiga Toxin EC Agar Base | 100G/瓶 500G/瓶 | 干粉和已制備好的培養(yǎng)基均在2-8℃密閉保存。 |
FD354 | Shiga toxin EC Selective Supplement | 5管/盒 | 2-8℃ |
用途
用于從臨床和非臨床樣品中選擇性分離產(chǎn)志賀毒素的大腸桿菌。
原理
產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌初發(fā)現(xiàn)是以血清型O157:H7爆發(fā)的形式出現(xiàn)在碎牛肉中。它初分離是在麥康凱山梨醇瓊脂上,但非O157血清型的產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌在該培養(yǎng)基上無法被鑒別(1)。一些非O157產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌菌株通常發(fā)酵山梨醇,因此麥康凱山梨醇瓊脂檢測不到這些菌株。
產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌可引發(fā)一系列疾病,包括輕度胃腸炎和出血性結(jié)腸炎甚至危及生命的溶血性尿毒癥綜合征(2)。
本培養(yǎng)基中的蛋白胨和酵母提取物提供氮源和碳源化合物、長鏈氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)素。緩沖鹽提供緩沖作用。混合顯色劑使產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌菌落呈紫紅色至紫色。產(chǎn)志賀毒素的大腸桿菌O157通常不發(fā)出熒光,而產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌非O157血清型是發(fā)熒光的(少數(shù)可能不發(fā)光)。其他腸桿菌科菌落顯示為無色或藍(lán)色或被抑制。選擇性添加劑抑制革蘭氏陽性菌和其他污染菌群的生長。
樣本類型
臨床樣本(糞便)、食品和乳品樣本
培養(yǎng)基成分
成分 | 克/升 |
特別蛋白胨 | 15.000 |
緩沖鹽混合物 | 3.100 |
顯色混合物 | 2.400 |
瓊脂 | 12.000 |
終pH值(25°C)6.9±0.2
配制
取32.50克溶1L蒸餾水,加熱至沸使培養(yǎng)基*溶解。請勿高壓滅菌。冷卻至45-50°C。加入2管復(fù)溶的添加劑FD354,,溶解冷卻后傾注平板。請勿高壓滅菌。
局限
需要生化和血清學(xué)檢驗(yàn)以終確認(rèn)
因?yàn)椴煌臓I養(yǎng)需求,某些菌株可能生長不佳
某些不產(chǎn)志賀毒素的大腸桿菌可能呈紫色
性能與評價(jià)
在保質(zhì)期和正確存儲(chǔ)前提下,按照說明書操作,即可保證培養(yǎng)基的性能。
質(zhì)量控制
外觀——淡黃色均勻自由流動(dòng)的粉末
成膠性——牢固,與1.5%瓊脂凝膠相當(dāng)
成品培養(yǎng)基顏色和透明度——平皿中為淡琥珀色,透明或輕微不透明凝膠
配比反應(yīng)——3.25%w/v(3.25g/100ml蒸餾水)水溶液在25℃的pH值為6.9±0.2
規(guī)定pH值——6.70-7.10
培養(yǎng)反應(yīng)
35-37°C 孵育24-48 小時(shí)
有機(jī)體 | 接種量 CFU | 生長 | 回收率 | 菌落顏色 |
大腸桿菌O157(ATCC 35150) | 50-100 | 旺盛 | ≥50 % | 紫紅色至紫色 |
陰溝腸桿菌(ATCC 13047) (00083*) | 50-100 | 旺盛 | ≥50 % | 藍(lán)色 |
大腸桿菌(ATCC 25922) (00013*) | ≥10³ | 抑制 | 0% | — |
糞腸球菌(ATCC 29212) (00187*) | ≥10³ | 抑制 | 0% | — |
*為WDCM編號
1.Heuvelink AE, van de Kar NC, Meis JF, Monnens LA, Melchers WJ . 1995. Characterization of verocytotoxin-producing Escherichia coli O157 isolates from patients with haemolytic uraemic syndrome in Western Europe. Epidemiol. Infect. 115:1–14
2.Karch H, Tar Pl, Bielaszewska M.2005. Enterohaemorrhagic Escherichia coli in human medicine. Int.J. Med MicrobioloL,295:405-418.