近年來,隨著生物醫藥技術的快速發展,細胞培養技術廣泛應用于免疫學、商業應用和生物制品等多個領域。細胞培養技術可用于分離、增殖和鑒定病毒,也適用于篩選抗癌藥物和對有毒物質進行檢測等方面的研究。
可以利用細胞培養技術進行大規模生物制品研發,如單克隆抗體、疫苗及重組蛋白的制備、藥物開發、干細胞移植、人造器官培養等。因此,細胞培養技術已成為科學研究和醫藥制品開發的關鍵因素之一。
細胞培養技術中使用的培養基主要包括合成細胞培養基和天然細胞培養基,其中應用廣泛的是天然培養基。血清是一種在體外培養細胞時加入的物質,它是在血漿中去除纖維蛋白原而分離出的一種成分十分復雜的混合物,用于細胞培養的血清主要是牛血清。
血清中富含細胞生長所必需的營養物質,在細胞培養過程中具有重要作用但實際生產中血清提取工藝復雜,成本高昂,給大規模生產帶來困難,不利于商業化開發,且血清成分復雜,無法有效質控,常見細胞源疫苗血清殘留對疫苗免疫效果有很大的影響。
疫苗生產多采用M199、DMEM、MEM等培養基加新生牛血清的方式,但由于血清成分的復雜性和不確定性,疫苗生產企業期待新型無血清培養基的上市。近年來,市面上出現了無血清培養基。無血清培養已成為包括疫苗在內的生物技術藥物生產的總趨勢。由于無血清培養基可*采用已知分子結構或構型組分的低蛋白, 甚至*不采用蛋白組分, 因此被廣泛應用于細胞工程領域。
締一生物為您介紹一款可無血清培養的細胞培養基,由上HiMedia公司生產M199改良型——SFRE 199細胞培養基。SFRE 199分為I型和II型,即SFRE 199-1和SFRE 199-2。開始研發是為了生長和維持培養Bak細胞(原代狒狒腎細胞)。
SFRE-199將M199標準配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細胞生長而未表現出毒性。另外,還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規培養基比較,細胞生長速率、產量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。
有報道,在SFRE 199-1生長的原代Bak細胞的群體二倍分裂時間(PDT)約為34.2小時,與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同,加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時。如果在SFRE 199-1中去除胰島素或硫酸鋅,則細胞不能融合,PDT延長。若含有胰島素和硫酸鋅,則其支持生長的能力相當于標準對照血清培養基。
近年來,無血清培養基的應用越來越廣泛,但也各有利弊,本文締一生物為您介紹無血清培養基的主要優缺點:
優點:
①無血清培養基不含血清,提高了實驗的重復性、準確性和穩定性;
②避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對細胞的損傷;
③無血清培養基中的蛋白質來源于重組蛋白或蛋白水解產物,提高了實驗效率;
④無血清培養基的成分和含量相對明確,能提高細胞產品的質量并有利于產物的分離提純;⑤無血清培養基在生物醫藥等領域有著極大的應用潛能;
⑥制備流程簡易,操作簡單。
缺點:
①無血清培養基的生產成本較高,不利于商業化開發與應用;
②目前低血清培養基研究開發的相關數據缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進細胞馴化技術的發展;
③多數無血清培養基的應用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性;
④細胞在無血清培養基中,對外界條件如物理和化學等因素的改變較敏感。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養、微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。