霍亂是一種古老且流行廣泛的烈性傳染病之一,屬于檢疫傳染病,曾在世界上引起多次大流行。霍亂弧菌是該病的病原體,學名V.cholera,屬弧菌科,是一種革蘭氏陰性菌。
人類在自然情況下是霍亂弧菌的主要易感者,通過污染的水源或飲食物經口傳染。在一定條件下,霍亂弧菌進入小腸后,依靠鞭毛的運動,穿過粘膜表面的粘液層,可能藉菌毛作用粘附于腸壁上皮細胞上,在腸粘膜表面迅速繁殖,經過短暫的潛伏期后便急驟發病。該菌不侵入腸上皮細胞和腸腺,也不侵入血流,僅在局部繁殖和產生霍亂腸毒素,此毒素作用于不粘膜上皮細胞與腸腺使腸液過度分泌,從而患者出現上吐下瀉,瀉出物呈“米泔水樣”并含大量弧菌,此為本病典型的特征。
霍亂弧菌分離與鑒定方法
生化鑒定
生化鑒定前,先分離霍亂弧菌,通常情況下,霍亂弧菌在TCBS培養基上典型霍亂弧菌菌落為黃色,扁平,真徑 2-3 mm;副溶血弧菌菌落呈圓形,邊緣整齊、濕潤、稍混濁、半透明,多數具尖心、斗笠狀,藍綠色菌落,直徑2-4 mm。
但傳統TCBS培養基上的其他的蔗糖發酵菌會影響TCBS瓊脂上弧菌的鑒定,影響檢測結果。或選用顯色培養基分離,締一生物為您推薦HiMedia公司(微生物公司)的HiCrome弧菌顯色培養基(貨號:MV1682),在該培養基上細菌β-半乳糖苷酶和培養基中所包含底物發生反應,使霍亂弧菌呈現紫色菌落;同時可以分離出副溶血性弧菌,呈現藍綠色菌落,可初步確認副溶血性弧菌和霍亂弧菌的存在。
可選用HiMedia公司HiBio-IDTM弧菌生化鑒定卡(貨號:KB007), 12種生化反應:
1 | 伏普試驗 |
2 | 精氨酸脫羧試驗 |
3 | 鹽耐量試驗(1%) |
4 | ONPG試驗 |
5 | 檸檬酸鹽利用試驗 |
6 | 鳥氨酸脫羧試驗 |
7 | 甘露醇發酵試驗 |
8 | 阿拉伯糖發酵試驗 |
9 | 蔗糖發酵試驗 |
10 | 葡萄糖發酵試驗 |
11 | 水楊苷發酵試驗 |
12 | 纖維二糖發酵試驗 |
特點:
△操作簡單,省時省力
△省心,所需試劑都包含在試劑盒中
△率,一次孵育即出結果
△實驗結果準確、可靠
2.血清凝集法
根據弧菌O抗原不同,分成Ⅵ個血清群,第Ⅰ群包括霍亂弧菌的兩個生物型。第Ⅰ群A、B、C三種抗原成份可將霍亂弧菌分為三個血清型:含AC者為原型(又稱稻葉型),含AB者為異型(又稱小川型),A、B、C均有者稱中間型(彥島型)。
1992年10月在印度東南部又發現了一個引起霍亂流行的新血清型菌株(0139),它引起的霍亂在臨床表現及傳播方式上與古典型霍亂*相同,但不能被01群霍亂弧菌診斷血清所凝集,抗01群的抗血清對0139菌株無保護性免疫。在水中的存活時間較01群霍亂弧菌長,因而有可能成為引起世界性霍亂流行的新菌株。
3.核酸擴增法
核酸擴增兩端,然后在體外模擬DNA體內復制的過程反復擴增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。技術,即聚合酶鏈式反應(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設計、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對應于待測病原微生物某一段特異性序列。
由霍亂弧菌引起的霍亂疾病,對人類健康危害很大,有效的檢測鑒定出霍亂弧菌對人類健康有著重要意義。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。