哺乳動物細胞培養基是供哺乳動物細胞(包括原代細胞和細胞系)生長、增殖或者分化的人工配制的營養液,一般可分為天然培養基和人工合成培養基。
在20世紀早期,從事細胞培養用的培養液都是天然培養基,如用淋巴液和血漿等。到20世紀中期,隨著一些營養物質的化學合成和工業發展,細胞生物學家開發出人工合成的培養基配方。一開始即要尋找細胞生長zui低需要滿足哪些營養。后來隨著不同細胞的營養需求,又增加了其他的營養成分,但都是要配合牛血清(zui常用胎牛血清)一起使用。原因在于經典的合成培養基都不含蛋白質、脂類和生長因子以及其他某些必要的營養成分,因此需要胎牛血清來額外提供這些營養物質。通常胎牛血清的量是加5%-20%。
那么有哪些經典合成的培養基呢?有如下幾種:
1、BME(Basal Medium Eagle): 它是由美國生理學家Harry Eagle開發的基礎培養基。它zui初是根據Hela細胞和小鼠的成纖維L細胞所需的zui低營養而設計的。它包含無機鹽、氨基酸和維生素等。后來許多培養基在它基礎上設計而成。
2、MEM(Minimum Essential Medium Eagle): MEM培養基也是Harry Eagle在BME配方基礎上改良而成。它比BME含有更高濃度的氨基酸,可同時用于貼壁細胞和懸浮細胞,例如HeLa、BHK-21、293、MCF-7細胞等。
3、DMEM:即意大利生理學家Dulbecco改良的Engle培養基。DMEMzui常用,能支持很多貼壁細胞生長,包括原代的成纖維細胞、神經元、HUVECs、平滑肌細胞以及一些細胞系如Hela(常用于癌癥和信號轉導研究)、293(常用于外源蛋白表達)、Cos-7(常用于轉染研究)等。
4、GMEM(Glasgow's Minimum Essential Medium):是對BME培養基的改良型,添加有10%的胰蛋白?磷酸鹽以及2倍濃度的氨基酸和維生素,適合培養BHK細胞等。
5、MEMα:是MEM培養基的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸鈉、硫辛酸、維生素B12、生物素和抗壞血酸。可作為DG44和其他DHFR陰性細胞的選擇培養基。也可用于培養角質細胞、原代大鼠星形細胞和人黑色素瘤細胞。
6、DMEM/F12: 它將 DMEM 的高濃度葡萄糖、氨基酸及維生素與 F-12的廣泛組分結合在一起,營養更豐富,可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長,包括 MDCK、膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞及小鼠成纖維細胞。
7、RPMI-1640:主要用于培養懸浮細胞。它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度維生素(如肌醇、膽堿),還包括生物素、維生素B12等MEM、DMEM沒有包含的成分。
8、M199:1950年由Morgan, Morton和Parker開發而成,zui初用于原代雞胚成纖維細胞的營養研究。現在常用于非轉化細胞和原代移植上皮細胞的培養以及疫苗和病毒的生產。
9、IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium):是DMEM的改良型,添加有硒、氨基酸和維生素,但缺乏鐵。用于快速生長的高密度細胞,例如 Jurkat, COS-7和巨噬細胞。
10、Leibovitz's L-15:用于培養無CO2環境的細胞。原先的碳酸氫鈉緩沖系統被游離堿性氨基酸、磷酸鹽和高濃度的半乳糖和丙酮酸鈉所替代。無須經常更換培養基。常用于病毒學診斷等密閉培養細胞的場合。
11、McCoy's :由Thomas McCoyzui早開發該配方。包含有谷胱甘肽、蛋白胨和高濃度葡萄糖。常用于培養來自正常骨髓,皮膚,牙齦,睪丸,小鼠腎,網膜,腎上腺,肺,脾,大鼠胚胎等的原代細胞。
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